Establishment of a culture condition for strong proliferation and enrichment of chicken spermatogonial stem cells in vitro

Abstract

سلولهای بنیادی اسپرمساز پرندگان پتانسیل بالقوهای به عنوان مدل برای مطالعات پایهای زیستشناسی سلولهای بنیادی اسپرمساز و نیز استفاده برای اهداف بیوتکنولوژی دارند. با این حال تعداد اندک این سلولها و حضور سلولهای سوماتیک بیضهای در کنار سلولهای بنیادی اسپرمساز، کاربردهای این سلولها را محدود نموده است. بنابراین، این مطالعه برای اولین بار، به منظور B بررسی اثر یک محیط کشت فاقد سرم و غنی شده با ترکیبی از انواع فاکتورهای رشد و نیز ، بر تکثیر و غنیسازی جمعیت 27 سلولهای بنیادی اسپرمساز جوجه تازه متولد شده تحت شرایط آزمایشگاهی، انجام شد. برای این منظور سلولهای بافت بیضه و همچنین EGF و LIF ،bFGF ،GDNFجوجه تازه متولد شده در یک محیط کشت فاقد سرم و غنی شده با فاکتورهای رشد به عنوان جایگزینی برای سرم، کشت داده شدند. حضور سلولهای بنیادی اسپرمساز در کشتهای سلولی حاصل از بافت B27 ASZ بیضه بوسیله تشخیص فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و بیان ژنهای 1 ،POU GPR و CVH ، 5F1 مورد بررسی قرار 125 گرفت. قبل از تیمار با محیط کشت غنی شده، تعداد اندکی از خوشهها و کلونیهای مرتبط با سلولهای بنیادی اسپرمساز در با فاکتورهای ذکر شده در بالا، شدیدا منجر به القاء تکثیر DMEM کشتهای سلولی ظاهر شدند. غنی شدن محیط کشت سلولهای بنیادی اسپرمساز جوجه شد. بعلاوه، تحت این شرایط کشت، اتصال و ماندگاری سلولهای سوماتیک بیضهای کاهش یافت و بنابراین به تدریج تعداد آنها در محیط کشت کاهش یافت. سلولهای بنیادی اسپرمساز غنی شده برای فعالیت الکالین ASZ فسفاتاز و بیان ژنهای 1 ،POU GPR و CVH ، 5F1 مثبت بودند. این مطالعه نشان میدهد که محیط کشت غنی 125 B شده با فاکتورهای رشد ذکر شده در بالا و نیز باعث القاء تکثیر و غنیسازی جمعیت سلولهای بنیادی اسپرمساز در کوتاه 27 مدت تحت شرایط آزمایشگاهی میشود.