Transfiction of Holstein Bull Spermatozoa by Lipofectamine
استفاده از لیپوفکتامین به منظور ترانسفکشن اسپرم گاو نژاد هلشتاین
Author:
, , , , , , , , ,Publisher:
Year
: 1395
Abstract: اساس انتقال ژن از طریق اسپرم بر مبنای توانایی سلولهای اسپرم برای اتصال به ملکول DNA خارجی و انتقال آن به اووسیت در موقع لقاح است. از مزایای عمده این روش نسبت به سایر روشها میتوان به بهرهوری بالا، هزینه کم و سهولت استفاده اشاره کرد. هدف از این مطالعه بررسی امکان انتقال ژن به اسپرم گاو بود. برای این منظور، اسپرم از ناحیه اپیدیدم بیضه گاوهای نژاد هلشتاین استحصال شد. با استفاده از روش لیپوفکشن، حامل حاوی ژن GFP به سلولهای اسپرم انتقال داده شد. به منظور بررسی انتقال DNA به اسپرم و همچنین زنده مانی اسپرمهای ترانسفکت به ترتیب از رودامین و رنگآمیزی آکریدین اورنج استفاده شد. نتایج نشان داد، در حدود 19 درصد از اسپرمهای حاصل از ناحیه اپیدیدیم بیضه قادر به جذب DNA خارجی بودند و افزایش مدت زمان انکوباسیون کمپلکس DNA- لیپوفکتامین با اسپرم از 30 تا 120 دقیقه اثر معنیداری بر روی جذب DNA خارجی نداشت. همچنین نتایج نشان داد، انتقال ژن به اسپرم گاو تأثیر معنیداری بر روی زنده مانی و تعداد اسپرمهای پیشرونده در مقایسه با اسپرمهای طبیعی، 120 دقیقه پس از ترانسفکشن نداشت، اگرچه در 30 الی 60 دقیقه اول از ترانسفکشن اختلاف معنیداری در تحرک اسپرمهای ترانسفکت مشاهده شد. به منظور بهینهسازی جذب DNA توسط اسپرم پیشنهاد میشود علاوه بر استفاده از ترکیباتی مانند EDTA به منظور حذف DNase، استفاده از سایر حاملها مانند توربوفکت و FuGene 6 نیز بررسی گردد.
DOI: 10.22067/ijasr.v8i4.55609
Collections
:
-
Statistics
Transfiction of Holstein Bull Spermatozoa by Lipofectamine
Show full item record
contributor author | Akram Teymoornejad | |
contributor author | اکرم تیمورنژاد | Fa |
contributor author | Mohammad Zandi | |
contributor author | Mohammad Reza Sanjabi | |
contributor author | Khosro Hoseini Pajooh | |
contributor author | Hamideh Ofoghi | |
contributor author | محمد زندی | |
contributor author | محمد رضا سنجابی | |
contributor author | خسرو حسینی پژوه | |
contributor author | حمیده افقی | |
date accessioned | 2020-06-05T11:44:53Z | |
date available | 2020-06-05T11:44:53Z | |
date copyright | 2017-01-08 11:58:24 | |
date issued | 1395 | |
identifier uri | http://libsearch.um.ac.ir:80/fum/handle/fum/3341245?locale-attribute=en | |
description abstract | اساس انتقال ژن از طریق اسپرم بر مبنای توانایی سلولهای اسپرم برای اتصال به ملکول DNA خارجی و انتقال آن به اووسیت در موقع لقاح است. از مزایای عمده این روش نسبت به سایر روشها میتوان به بهرهوری بالا، هزینه کم و سهولت استفاده اشاره کرد. هدف از این مطالعه بررسی امکان انتقال ژن به اسپرم گاو بود. برای این منظور، اسپرم از ناحیه اپیدیدم بیضه گاوهای نژاد هلشتاین استحصال شد. با استفاده از روش لیپوفکشن، حامل حاوی ژن GFP به سلولهای اسپرم انتقال داده شد. به منظور بررسی انتقال DNA به اسپرم و همچنین زنده مانی اسپرمهای ترانسفکت به ترتیب از رودامین و رنگآمیزی آکریدین اورنج استفاده شد. نتایج نشان داد، در حدود 19 درصد از اسپرمهای حاصل از ناحیه اپیدیدیم بیضه قادر به جذب DNA خارجی بودند و افزایش مدت زمان انکوباسیون کمپلکس DNA- لیپوفکتامین با اسپرم از 30 تا 120 دقیقه اثر معنیداری بر روی جذب DNA خارجی نداشت. همچنین نتایج نشان داد، انتقال ژن به اسپرم گاو تأثیر معنیداری بر روی زنده مانی و تعداد اسپرمهای پیشرونده در مقایسه با اسپرمهای طبیعی، 120 دقیقه پس از ترانسفکشن نداشت، اگرچه در 30 الی 60 دقیقه اول از ترانسفکشن اختلاف معنیداری در تحرک اسپرمهای ترانسفکت مشاهده شد. به منظور بهینهسازی جذب DNA توسط اسپرم پیشنهاد میشود علاوه بر استفاده از ترکیباتی مانند EDTA به منظور حذف DNase، استفاده از سایر حاملها مانند توربوفکت و FuGene 6 نیز بررسی گردد. | Fa |
publisher | Ferdowsi University of Mashhad Press | |
publisher | انتشارات دانشگاه فردوسی مشهد | Fa |
title | Transfiction of Holstein Bull Spermatozoa by Lipofectamine | |
title | استفاده از لیپوفکتامین به منظور ترانسفکشن اسپرم گاو نژاد هلشتاین | Fa |
contenttype | External Fulltext | |
identifier doi | 10.22067/ijasr.v8i4.55609 | |
journal title | Iranian Journal of Animal Science Research | |
journal title | پژوهشهای علوم دامی ایران | Fa |
journal volume | 8 | |
journal issue | 1730 | |
identifier link | https://ijasr.um.ac.ir/article/view/55609/ | |
identifier ojsid | 55609 |